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免疫荧光是一种使用荧光显微镜进行光学显微镜检查的技术,主要用于生物样本。该技术利用了抗体针对其抗原,同时使用荧光染料在细胞内产生抗原抗体的信号,因此可以可视化目标分子在样品中的分布。
直接免疫荧光
直接免疫荧光使用单个、一抗,与荧光团或荧光染料化学连接。一抗识别目标分子(抗原)并与称为表位的特定区域结合。可以通过荧光显微镜检测附着的荧光团,根据所使用的荧光团,一旦激发,就会发出特定波长的光。直接免疫荧光虽然不太常见,但比间接方法具有显着的优势。通过直接用荧光染料标记的一抗直接检测抗原,减少了程序中的步骤数,节省了时间。时间并减少非- 特定背景信号。
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间接免疫荧光
间接免疫荧光抗体
间接免疫荧光检测
间接免疫荧光检测使用两种抗体;未标记的第一(一抗)抗体特异性结合目标抗原,而二抗则标记有荧光团,识别一抗并与其结合。多个二抗可以结合单个一抗。这通过增加每个抗原的荧光团分子数量来提供信号放大。该方案比上述一抗(或直接)方案更复杂、更耗时,但具有更大的灵活性,因为多种不同的二抗和检测技术可用于给定的一抗。
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